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人法尼醇X受體(FXR)試劑盒實驗原理及注意事項
人法尼醇X受體(FXR)elisa試劑盒實驗原理:
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人法尼醇 X 受體(FXR)水平。用純化的人法尼醇X 受體(FXR)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入法尼醇 X 受體(FXR),再與 HRP 標記的法尼醇 X 受體(FXR)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過*洗滌后加底物 TMB 顯色。 TMB 在 HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的法尼醇 X受體(FXR)呈正相關。用酶標儀在 450nm波長下測定吸光度( OD 值),通過標準曲線計算樣品中人法尼醇 X 受體(FXR)濃度。
人法尼醇X受體(FXR)ELISA試劑盒注意事項:
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
3.各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4.請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本 OD 值大于標準品孔孔的 OD 值),請先用樣品稀釋液稀釋定倍數(shù)( n 倍)后再測定,計算時請*后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5.封板膜只限次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
人法尼醇X受體(FXR)ELISA試劑盒計算:
以標準物的濃度為橫坐標, OD 值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的
OD 值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與 OD 值計算出標
準曲線的直線回歸方程式,將樣品的 OD 值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),
即為樣品的實際濃度。
保存條件及有效期
1.試劑盒保存:; 2-8℃。
2.有效期: 6 個月
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